血鈣濃度檢測試劑盒說明書 |
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血鈣濃度檢測試劑盒說明書 微量法 注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。 測定意義: 血鈣幾乎全部存在于血漿中,所以血鈣主要指血漿鈣。血漿鈣有離子鈣和結(jié)合鈣兩種形式, 其中只有離子鈣直接起生理作用,它與結(jié)合鈣處于動態(tài)平衡,并受血液 pH 的影響。血鈣水 平與多種重要的生理功能相關,過高或過低都會影響正常生理功能。本試劑盒用于檢測血液 中游離鈣濃度。 測定原理: 在強堿溶液中游離鈣與 GBHA 反應生成紅色鈣-GBHA 復合物,在 520nm 有吸收峰;通過測定 520nm 吸光度,計算游離鈣濃度。 自備儀器和用品: 可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、石英比色皿/96 孔板、無水甲醇、丙酮和蒸餾水。 試劑組成和配置: 試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。 試劑二:液體×1 瓶,4℃保存。 試劑三:液體×1 瓶(空瓶,試劑自備)。取10 mL試劑瓶。依次加入9 mL無水甲醇和1mL丙酮,蓋緊混勻即可。 標準液:液體×1 瓶,3μmol/mL,4℃保存。 血鈣濃度測定操作: 1. 分光光度計預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到520nm,蒸餾水調(diào)零。 2. 空白管:取石英比色皿/96孔板,依次加入蒸餾水12μL,試劑一50μL,混勻;再加入試劑二50μL,混勻;zui后加入試劑三100μL,混勻;靜置5min后于520nm測定吸光度A空白管。做一個空白管即可。 3. 標準管:取石英比色皿/96孔板,依次加入標準液12μL,試劑一50μL,混勻;再加入試劑二50μL,混勻;zui后加入試劑三100μL,混勻;靜置5min后于520nm測定吸光度A標準管。做一個標準管即可。 4. 測定管:取石英比色皿/96孔板,依次加入血液樣品12μL,試劑一50μL,混勻;再加入試劑二50μL,混勻;zui后加入試劑三100μL,混勻;靜置5min后于520nm測定吸光度A測定管。記為 A 測定管。 注意:空白管和標準管只需測定一次,做三次重復。 血鈣濃度計算公式: 血鈣含量(μmol/mL)= [C 標準液×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]×V 樣品總=3×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) C 標準液:3μmol/mL; V 樣總:樣品總體積,1 dL=100 mL。
注意事項: 1. 宜早晨空腹采血,并且采血后應該盡快完成測定。 2. 靜置 5 分鐘后立即測定。 3. 加試劑三后,應該在 30 min 內(nèi)完成該管的測定。 4. zui低檢出限為0.1μmol/mL。 |