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猴腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液說(shuō)明書(shū)
點(diǎn)擊次數(shù):2456 更新時(shí)間:2016-07-31

 

 

猴腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液說(shuō)明書(shū)

 

(細(xì)胞培養(yǎng)及分子生物學(xué))

 

【產(chǎn)品規(guī)格】

 

200ml/Kit

 

貨號(hào):WBC1078HZ

 

【產(chǎn)品組成】

 

為方便廣大用戶使用,試劑內(nèi)容如下:

 

 

 

 

名稱

產(chǎn)品編號(hào)

 

規(guī)格

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

A

猴腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液

 

 

 

200ml

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

B

樣本稀釋液(贈(zèng)品)

2010C1119

 

200ml

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C

清洗液(贈(zèng)品)

 

 

2010X1118

 

200ml

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

D

F 液(贈(zèng)品)

 

 

F2013TBD

 

200ml

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

E

紅細(xì)胞裂解液(贈(zèng)品)

NH4CL2009

 

100ml

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

F

說(shuō)明書(shū)

 

 

 

 

 

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】

 

 

 

 

 

 

 

A 適用儀器

 

 

 

 

 

 

 

 

zui大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)

 

 

 

 

 

B 耗材

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

產(chǎn)品名稱

 

產(chǎn)品貨號(hào)

 

產(chǎn)地

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

15ml 離心管散裝

 

339650

 

美國(guó) NUNC

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

15ml 離心管架裝

 

339651

 

美國(guó) NUNC

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

50ml 離心管散裝

 

339652

 

美國(guó) NUNC

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

50ml 離心管架裝

 

339653

 

美國(guó) NUNC

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

無(wú)菌膠頭滴管或塑料滴管

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

【檢驗(yàn)方法】

 

 

 

 

 

 

 

 

全過(guò)程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。

 

  • 首先制備組織單細(xì)胞懸液,制備方法詳見(jiàn)組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)

 

  • 取一支 15ml 離心管,加入與制備的組織單細(xì)胞懸液等量的分離液(注:分離液zui少不得少于 5ml)。

 

 

  • 用吸管小心吸取制備的組織單細(xì)胞懸液加于分離液液面上,400-500g,離心 20-30min。(注:根據(jù)組織單細(xì)胞懸液樣本量確定離心條件,組織單細(xì)胞懸液量越大,離心力越大,離心時(shí)間越長(zhǎng),具體離心條件需客戶自行摸索,以達(dá)到*分離效果)。

 

  • 離心后用吸管小心吸取所有環(huán)狀乳白色細(xì)胞層(一層或兩層),加入 10 ml 清洗液(產(chǎn)品編號(hào):2010X1118),混勻細(xì)胞。250g,離心 10min。重復(fù)洗滌 2-3 次,即得所需白細(xì)胞。

 

  • 如有紅細(xì)胞殘留請(qǐng)使用紅細(xì)胞裂解液(產(chǎn)品編號(hào):NH4CL2009)裂解紅細(xì)胞,具體操作方法詳見(jiàn)紅細(xì)胞裂解液使用說(shuō)明

 

【注意事項(xiàng)】

 

  • 全過(guò)程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得*的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,在取樣 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),樣品存放時(shí)間越長(zhǎng),細(xì)胞分離效果越差。樣品放置超過(guò) 6h 后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。

 

  • 本實(shí)驗(yàn)不要使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,應(yīng)使用無(wú)靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過(guò)后的玻璃制品,因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面會(huì)變成毛面,影響細(xì)胞分離效果。

 

  • 分離液用量大于制備的組織單細(xì)胞懸液樣本時(shí),分離效果更佳。

 

  • 如實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過(guò)低,請(qǐng)上海研謹(jǐn)技術(shù)以尋求幫助

 

【儲(chǔ)存條件及有效期】

 

18-25℃保存,有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌,需無(wú)菌條件操作。無(wú)菌條件下操作,啟

 

封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。

 

【參考值(參考范圍)】

 

本實(shí)驗(yàn)白細(xì)胞提取率及純度大于 80%。

 

下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例,用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。

 

 

紅細(xì)胞

 

白細(xì)胞

 

血小板

 

 

 

 

 

 

 

 

4.0-10.0×109

 

含量(個(gè)/L

4.0-5.5×1012

中性粒細(xì)胞

淋巴細(xì)胞

單核細(xì)胞

1.0-3.0×1011

 

 

50%-70%

20%-40%

3%-8%

 

 

 

 

 

 

 

 

【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】

 

1. 組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)

 

 

  • 所獲得白細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)。

 

  • 所獲得白細(xì)胞的核酸提取技術(shù)。

 

  • 所獲得白細(xì)胞的鑒定方法A.流式細(xì)胞技術(shù)
  • B.免疫組化技術(shù)
  • C.原位雜交技術(shù)

 

D.PCR 技術(shù)

 

注:上述技術(shù)方案詳情請(qǐng)登陸本公司搜索細(xì)胞分離、

 

純化、擴(kuò)增、鑒定及生物治療技術(shù)手冊(cè),并在說(shuō)明書(shū)項(xiàng)目欄下下載使用。

 

【可能存在的問(wèn)題及解決方法】

 

1. 由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問(wèn)題及解決方案如下表所示:

 

出現(xiàn)情況

出現(xiàn)原因

建議解決方案

 

 

 

離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層

轉(zhuǎn)速過(guò)小或離心時(shí)間過(guò)短

適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速

 

 

離心后目的細(xì)胞存在于分離液中

轉(zhuǎn)速過(guò)大或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

 

 

 

 

離心后白環(huán)層彌散

細(xì)胞密度過(guò)大

調(diào)整細(xì)胞密度

 

 

離心后白環(huán)層太淺或看不見(jiàn)

細(xì)胞密度過(guò)小

 

 

 

 

 

  • 本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心,其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對(duì)離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。建議對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí),恒定離心時(shí)間,對(duì)離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。

 

  • 本分離液依照標(biāo)準(zhǔn),全部使用藥用級(jí)原料,性能指標(biāo)與國(guó)產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同,可

 

能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不*的情況,可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。

 

注:在對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí),離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù),直至達(dá)到*分離效果,

 

離心力zui小不得小于 400g,zui大不得大于 1200g。離心時(shí)間以 20-30min 為準(zhǔn)。

 

TBD2011CP

TBD

雞臟器組織單核細(xì)胞分離液試劑盒

HY2011M

TBD

猴外周血單核細(xì)胞分離液試劑盒

HY1086MP

TBD

猴臟器組織單核細(xì)胞分離液試劑盒

HY2011P

TBD

豬外周血單核細(xì)胞分離液試劑盒

HY2011PP

TBD

豬臟器組織單核細(xì)胞分離液試劑盒

HY2011H

TBD

馬外周血單核細(xì)胞分離液試劑盒

HY2011P

TBD

馬臟器組織單核細(xì)胞分離液試劑盒

TBD2011G

TBD

羊外周血單核細(xì)胞分離液試劑盒

TBD2011GP

TBD

羊臟器組織單核細(xì)胞分離液試劑盒

TBD2011F

TBD

魚(yú)全血單核細(xì)胞分離液試劑盒

TBD2011FP

TBD

魚(yú)臟器組織單核細(xì)胞分離液試劑盒

中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

 

 

LZS11131

TBD

人中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1091

TBD

大鼠外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1091P

TBD

大鼠臟器組織中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1100

TBD

小鼠外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1100P      雷同

TBD

小鼠臟器組織中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS11133

TBD

兔外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS11133P    雷同

TBD

小鼠臟器組織中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1087

TBD

狗外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1087P

TBD

狗臟器組織中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1094

TBD

牛外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1094P

TBD

牛臟器組織中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1093

TBD

豚鼠外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1093P

TBD

豚鼠臟器組織中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1098C

TBD

雞外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1098CP

TBD

雞臟器組織中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1086

TBD

猴外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1086P

TBD

猴臟器組織中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1118

TBD

豬外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

LZS1118P

TBD

豬臟器組織中性粒細(xì)胞分離液試劑盒

滬公網(wǎng)安備 31011802001676號(hào)

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