間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化試劑盒
,成軟骨誘導(dǎo)液
貨號(hào):YJ-MSCYD-003
價(jià)格: 2880.0
規(guī)格: 200ml
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品為團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化的間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化試劑盒,可增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞向成軟骨細(xì)胞分化的能力。
本產(chǎn)品僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。
產(chǎn)品組成成分及保存
試劑名稱 | 體積 | 保存條件 | 有效期 |
地塞米松 | 20μL | -20℃ | 1 Year |
脯氨酸 | 200μL | -20℃ | 1 Year |
抗壞血酸 | 600μL | -20℃ | 1 Year |
TGF-β1 | 2mL | -20℃ | 1 Year |
丙酮酸鈉 | 2mL | -20℃ | 1 Year |
ITS 添加物 | 2mL | -20℃ | 1 Year |
雙抗 | 2mL | -20℃ | 1 Year |
胎牛血清 | 20mL | -20℃ | 1 Year |
基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 200mL | 2-8℃ | 1 Year |
甲苯胺藍(lán)染色液 | 5mL | RT(室溫) | 1 Year |
注意:
1.為保證產(chǎn)品的有效性,請(qǐng)避免反復(fù)凍融。
2.現(xiàn)用現(xiàn)配,配制好的預(yù)混液保存于2-8℃,有效期1 month;配制好的完全培養(yǎng)基保存于2-8℃,有效期12 hours.
產(chǎn)品使用說明
1. 成軟骨誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基的配制
①室溫條件下融化各因子及血清。各因子融化后,瞬時(shí)離心,使溶液集中于離心管底部。
(注意:若因子或血清中有沉淀物,屬正?,F(xiàn)象,無須過濾,避免成分丟失。)
②根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量,于無菌操作臺(tái)中配制誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,建議每次配制50mL,配制比例見下表:
試劑成分 | 配制比例 | 50mL配制體系 |
地塞米松 | 0.01% | 5μL |
脯氨酸 | 0.1% | 50μL |
抗壞血酸 | 0.3% | 150μL |
TGF-β1 | 1% | 500μL |
丙酮酸鈉 | 1% | 500μL |
ITS 添加物 | 1% | 500μL |
雙抗 | 1% | 500μL |
胎牛血清 | 10% | 5mL |
基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 補(bǔ)充至所需體積 | 補(bǔ)充至總體積為50mL |
2. 成軟骨誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)步驟
①建議取第3~5代、純度達(dá)90%以上、狀態(tài)良好的間充質(zhì)干細(xì)胞,將其消化下來,離心收集,使用間充質(zhì)干細(xì)胞完全培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞密度為1~5×105個(gè)cell/mL,均勻鋪于6孔板中,每孔2mL,置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
(注意:此處細(xì)胞密度及培養(yǎng)液體積以6孔板為例,若為其它培養(yǎng)器皿,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整細(xì)胞密度及培養(yǎng)液體積。)
②待細(xì)胞匯合度達(dá)80%~100%時(shí),即可進(jìn)行誘導(dǎo)分化。
③小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清,沿孔壁緩慢加入提前配制好的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,每孔2mL,置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
(注意:完全培養(yǎng)基加入細(xì)胞前需提前置于37℃預(yù)熱。)
③每2day換用新鮮的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基。換液時(shí),若細(xì)胞培養(yǎng)上清顏色變?yōu)槌吻宓狞S色,是由于細(xì)胞量較大,培養(yǎng)基消耗較快導(dǎo)致的,請(qǐng)及時(shí)調(diào)整為每日換液。
(注意:完全培養(yǎng)基加入前需提前置于37℃預(yù)熱。)
④細(xì)胞誘導(dǎo)3周后,即可進(jìn)行甲苯胺藍(lán)染色鑒定。
3. 甲苯胺藍(lán)染色分析
①細(xì)胞誘導(dǎo)分化結(jié)束后,小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清,1×PBS潤洗1~2次。每孔加入1mL細(xì)胞固定液(4%中性甲醛溶液等),室溫固定30 min。
②吸棄細(xì)胞固定液,1×PBS潤洗2次。沿孔壁緩慢加入甲苯胺藍(lán)染色液,每孔1mL,室溫染色30min。
(注意:染色液底部可能會(huì)有沉淀,吸取時(shí)盡量不要觸及底部。若染色后有沉淀,1×PBS洗去即可。)
③吸出染色液,1×PBS潤洗,去掉浮色。顯微鏡下觀察細(xì)胞染色效果,背景呈淡藍(lán)色,成軟骨細(xì)胞呈紫紅色。
(注意:染色液可重復(fù)使用,建議收集。)
質(zhì)量控制
無菌檢測(細(xì)菌、真菌和支原體檢測)
pH測試
滲透壓檢測
內(nèi)毒素
相關(guān)產(chǎn)品
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注意事項(xiàng)
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。
從2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤色服務(wù),協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!
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實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù):
實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
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細(xì)胞熒光染料標(biāo)記檢測實(shí)驗(yàn)
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染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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