家畜用囊蟲抗體檢測試劑盒說明書
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:家畜用囊蟲抗體檢測試劑盒
英文名稱:Cysticercus(Cyt)Antibody Test Kit for Livestock
【包裝規(guī)格】96份/盒
【預(yù)期用途】本試劑盒采用夾心法 ELISA定性檢測家畜血清或血漿中的特異性囊蟲抗體,
可作為囊蟲病輔助檢測。
【檢測原理】如果待檢樣品中含有囊蟲抗體,就會與包被板上的囊蟲抗原及第二步加入的囊
蟲抗原酶標(biāo)結(jié)合物特異性結(jié)合。間接結(jié)合在包被板上的囊蟲抗原酶標(biāo)結(jié)合物與底物反應(yīng)的
顯色狀況即可反映出樣品中是否含有囊蟲抗體。
【儲存條件及有效期】2~8℃保存,防止冷凍,有效期為 12個月。
【適用儀器】含 450nm和 630nm波長酶標(biāo)儀;37℃恒溫設(shè)備;可調(diào)微量移液器。
【樣品要求】
1.本試劑僅適用于檢測牛、羊等家畜血清或血漿。
2.為取得最佳實驗效果,避免使用含疊氮鈉、高血脂、長菌以及嚴(yán)重溶血的樣品;
3.短期(3天內(nèi))將進(jìn)行檢測的血清樣品可存放于 2~8℃;如需長期保存,應(yīng)置于-20℃
以下,避免反復(fù)凍融。
【檢驗方法】
1.加稀釋液:每孔加樣品稀釋液(5號液)2滴。
2.加樣反應(yīng):樣品孔,每孔僅加入 10μL待檢樣品;陰性對照 2孔,每孔僅加入 10μL陰
性對照品;陽性對照 2孔,每孔僅加入10μL陽性對照品。蓋好封板膜,37℃避光反
應(yīng) 30分鐘。
3.洗板:甩去孔內(nèi)液體,每孔加洗滌液(2號液)1滴,立即用蒸餾水注滿,靜置 30秒
后甩去;再直接用蒸餾水洗滌四次,每次均需靜置 30秒;最后一次甩去拍干。
4.加酶反應(yīng):每孔加酶標(biāo)結(jié)合物(1號液)2滴,蓋好封板膜,37℃避光反應(yīng) 30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,如上洗板,拍干。
5.顯色反應(yīng):加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各 1滴,混勻,37℃避光顯色 10分
鐘
6.終止反應(yīng):加終止液(6號液)1滴,用酶標(biāo)儀于 450nm波長(630nm作為參比波長)
讀取 OD值。
【參考值】
1.Cut-off值 (COV)=陰性對照平均 OD值×2.1 (陰性對照孔 OD值<0.05時,按 0.05計)。
2.有效性判定:
陰性對照孔 OD值≤0.15(若大于 0.15則實驗無效);
陽性對照孔 OD值≥0.50(若小于 0.50則實驗無效)。
【檢驗結(jié)果的解釋】
樣品 OD值≥COV,判為囊蟲抗體陽性;
樣品 OD值<COV,判為囊蟲抗體陰性。
【檢驗方法的局限性】本試劑盒僅供篩查,不作為確診依據(jù)。
【注意事項】
1.試劑盒各組份從冷藏環(huán)境中取出時,必須平衡至室溫后,方可開封啟用。未使用完的
試劑組份應(yīng)及時放回 2~8℃密封保存。
2.加試劑前應(yīng)將試劑輕搖、混勻。
3.孵育時必須用封板膜密封板孔,封板膜不可以重復(fù)使用。
4.不同批次試劑盒的試劑組份或說明書不可混用。瓶蓋每次使用后要蓋緊,各瓶之間瓶
蓋不可混用。
5.用棄的試劑盒及樣品都應(yīng)按污染物妥善處理。試劑盒內(nèi)終止液有腐蝕性,須小心使用。
【儲存條件及有效期】 2~8℃保存,防止冷凍,有效期為 12個月。
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